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本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

1.操作簡(jiǎn)便、快捷。可直接加入到檢測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。

商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Mouse FGF-4 Protein

產(chǎn)品中文名稱：重組小鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4（FGF-4）

規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

貨號(hào)：EY-01X8780
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

序列:氨基酸序列來源于：小鼠FGF4 (P11403) (Ser67-Leu202) 表達(dá)的蛋白片段。

活性:Testing in Progress

蛋白長(zhǎng)度：重組人 MIF 由120個(gè)氨基酸組成，預(yù)測(cè)分子量為13.1 KD。

純度:> 95 % ，使用SDS-PAGE檢測(cè)

通過LAL法測(cè)定，每微克蛋白里內(nèi)毒素含量<0.1 EU。

產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無菌的20 mM Tris，50 mM NaCl，pH 8.0。

基因ID:14175

使用中注意事項(xiàng):開蓋使用前，請(qǐng)先離心。本產(chǎn)品為凍干粉，推薦動(dòng)?動(dòng)

背景

Fibroblast growth factor 4 (FGF4) is a member of the fibroblast growth factor (FGF) family that possess broad mitogenic and cell survival activities and play key roles in growth and survival of stem cells during embryogenesis, tissue regeneration, and carcinogenesis. FGF4 was identified by its strong oncogenic transforming activity and is a potent angiogenic factor, expressed in several highly vascularized tumors and also in adult mouse testis, intestine, and brain. Studies on the mouse homolog suggests a function in bone morphogenesis and limb development through the sonic hedgehog (SHH) signaling pathway. Furthermore, FGF4 regulates neural progenitor cell proliferation and neuronal differentiation. Recent studies show a growth-promoting role for FGF4 in human embryonic stem cells and a putative feedback inhibition mechanism by a novel FGF4 splice isoform that may serve to promote differentiation at a later stages of development.

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CD36L1/SRB1 peptide 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原 0.5mgCD36L1/SRB1 peptide 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原

BNIP3L Protein Human 重組人 BNIP3L 蛋白

FZD1重組小鼠 Frizzled-1 / FZD1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

APCS Protein Mouse 重組小鼠 Serum amyloid P component / APCS / SAP 蛋白 (His 標(biāo)簽)

F3重組人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白  Protein

豬氧化酶(XOD)檢測(cè)試劑盒

Human keratinocyte aocrine factor (KAF) ELISA Kit / amphiregulin (AR) ELISA Kit 人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)檢測(cè)試劑盒/雙調(diào)蛋白(AR)檢測(cè)試劑盒

Porcinephospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit 豬0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAlphaNAG(HumanAlphaN-acetylglucosaminidase)ELISAKit人αN已酰氨基葡糖苷酶

血液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

PlaHumanVitaminC,VCELISAKit植物C(VC)檢測(cè)試劑盒

轉(zhuǎn)基因植物Bt基因核酸檢測(cè)試劑盒   48T

轉(zhuǎn)基因植物Sad1基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

轉(zhuǎn)基因植物Sad1基因核酸檢測(cè)試劑盒   48T

轉(zhuǎn)基因植物cry1A基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： BMPR-1A ELISA Kit

Rabbit ierleukin 10 (IL-10) ELISA Kit 兔子白介素10(IL-10)檢測(cè)試劑盒

日本血吸蟲(SJ)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMKK6(Humanmitogenactivatedproteinkinasekinase6)ELISAKit人原活化蛋白激酶激酶6

體液脊髓過氧化酶(MPO)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitFSH犬促卵泡素

重組小鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4（FGF-4）FZD1重組小鼠 Frizzled-1 / FZD1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CD36L1/SRB1 peptide 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原 0.5mgCD36L1/SRB1 peptide 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原

F3重組人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白  Protein

BNIP3L Protein Human 重組人 BNIP3L 蛋白

APCS Protein Mouse 重組小鼠 Serum amyloid P component / APCS / SAP 蛋白 (His 標(biāo)簽)

適用于人類或臨床診斷