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產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類(lèi)或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱(chēng)：Mouse IL-20 Protein, His tag (Animal-Free)

產(chǎn)品中文名稱(chēng)：重組小鼠白介素20,His標(biāo)簽無(wú)動(dòng)物源IL-20

規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

貨號(hào)：EY-01X8861
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

表達(dá)宿主:大腸桿菌

種屬:小鼠

序列:氨基酸序列來(lái)源于：小鼠源IL-20 (Leu25-Leu176) (Q9JKV9)

活性:Measure by its ability to induce proliferation in BaF3 cells transfected with human IL-20 R alpha and human IL-20 R beta.The ED?? for this effect is <2 ng/mL.

蛋白長(zhǎng)度：重組人IL-20蛋白由152個(gè)氨基酸組成，預(yù)測(cè)分子量為動(dòng)?動(dòng)

背景

Interleukin 20 (IL-20) predicts a molecular mass of 17.6 kDa. The IL-20 subfamily of cytokines is comprised of IL-19, IL-20, IL-22, IL-24, and IL-26. It regulates of differentiation of keratinocytes during inflammation, the expansion of multipotential hematopoietic progenitor cells.

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

1.操作簡(jiǎn)便、快捷。可直接加入到檢測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性?xún)?nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator 0.5mgCFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) 囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗原

AKR1A1 Protein Human 重組人 AKR1A1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

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GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

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豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA 試劑盒

Human ai Ku aibody (ai-Ku-Ab) ELISA Kit 人抗Ku抗體(ai-Ku-Ab)檢測(cè)試劑盒

PorcineCollageypeⅢ,ColⅢELISAKit 豬Ⅲ型膠原(ColⅢ)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

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中文名稱(chēng)   方法   規(guī)格

人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISAKit   ELISA. 

人葡萄糖激酶(GCK)ELISAKit   ELISA. 

人單胺氧化酶(MAO)ELISAKit   ELISA.

兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 試劑盒

Rat angiopoietin 4 (ANG-4) ELISA Kit 大鼠血管生成素4(ANG-4)檢測(cè)試劑盒

Humahyroglobulin,TGELISAKit 人甲狀腺球蛋白(TG)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanCytotoxin-associatedprotein,CagA檢測(cè)試劑盒人細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)檢測(cè)試劑盒

組織IKKβ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Humanplasminogenactivatorinhibitor，PAIELISAKit人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)檢測(cè)試劑盒

重組小鼠白介素20,His標(biāo)簽無(wú)動(dòng)物源IL-20IL13RA1重組小鼠 IL-13Ra1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

CFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator 0.5mgCFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) 囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗原

CAT重組人 CAT / Catalase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

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GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)