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產品名稱:大鼠氣管成纖維細胞

產品特點:大鼠氣管成纖維細胞公司正在出售的產品CL187/CCL187細胞,人大腸癌細胞 人黑色素瘤細胞,M14細胞 人多發性骨髓瘤細胞;RPMI-8226 [RPMI8826] LRRTM4 Others Human 人 LRRTM4 人細胞裂解液 293T, SV40轉化的人胚腎上皮細胞系 小鼠原B細胞

產品型號:

更新日期:2024-12-10

訪問次數:356

大鼠氣管成纖維細胞的詳細資料:

大鼠氣管成纖維細胞

實驗報告:

大鼠氣管成纖維細胞
一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細胞簡介:

大鼠氣管成纖維細胞

大鼠氣管成纖維分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環狀軟骨構成,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環,缺口向后,各軟骨環以韌帶連接起來,環后方缺口處由平滑肌和致密結締組織連接,保持了持續張開狀態。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的支氣管成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。氣管成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持組織的正常形態,合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

產品名稱

大鼠氣管成纖維細胞

組織來源

氣管

英文名稱

Rat Tracheal   Fibroblast Cells

產品規格

5×105cells/T25細胞培養瓶

 

方法簡介:

大鼠氣管成纖維細胞

實驗室分離的大鼠氣管成纖維采用膠原酶-聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的大鼠氣管成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息:

大鼠氣管成纖維細胞

培養基:含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態:成纖維細胞樣

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養條件:氣相:空氣,95%CO25%

大鼠氣管成纖維體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的培養狀態。

大鼠氣管成纖維細胞

注意事項:

大鼠氣管成纖維細胞
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現象。觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養基重懸細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產品:
大鼠氣管成纖維細胞

大鼠泛素蛋白(Ub)檢測試劑盒 ,英文名: Ub ELISA Kit

Porcine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit 豬免疫球蛋白M(IgM)檢測試劑盒

雞特定基因序列(Chicken)核酸檢測試劑盒 48T

CLIAKitforM-AChRM3(HumanmuscarinicacetylcholinereceptorM3)ELISAKit人受體亞型M3

體液游離氨基酸含量比色法定量檢測試劑盒20

ELISAKitLT家蠶卵黃蛋白

TEK重組人 Tie2 / CD202b 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

線粒體外膜轉位酶70A(TOMM70A)重組蛋白 Recombinant Translocase Of Outer Mitochondrial Membrane 70A (TOMM70A)

NTM重組人 NTM / Neurotrimin 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CD200R1 Protein Human 重組人 CD200R1 蛋白 (His & Fc 標簽)

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

線粒體外膜轉位酶70A(TOMM70A)重組蛋白 Recombinant Translocase Of Outer Mitochondrial Membrane 70A (TOMM70A)

CD200R1 Protein Human 重組人 CD200R1 蛋白 (His & Fc 標簽)

TEK重組人 Tie2 / CD202b 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

NTM重組人 NTM / Neurotrimin 蛋白 (Fc 標簽) Protein

小鼠受體(FOLR)檢測試劑盒 96T/48T

Residues of rat and bovine serum albumin detection ELISA Kit 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測檢測試劑盒

HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISAKit 人特異性巨噬細胞武裝因子(SMAF)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor17-KSELISAKit大鼠17-同類固醇

飲料抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒20

MouseLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit小鼠鉤端IgG(LepIgG)檢測試劑盒96T96T

大鼠氣管成纖維細胞小鼠組胺(mouse Histamine)   作用:   ELISA   規格:      進口分裝

小鼠熱休克蛋白70(mouse HSP70)   作用:   ELISA   規格:      進口分裝

小鼠羥脯酸(mouse HYP)   作用:   ELISA   規格:      進口分裝

小鼠高遷移率族蛋白(mouse HMGB1)   作用:   ELISA   規格:      進口分裝


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