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產(chǎn)品名稱(chēng)：人表皮角化細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn)：人表皮角化細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品Hela 299(人細(xì)胞) 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基-2EpiCM-2 小鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞培養(yǎng)基 ENG Others Human 人 Endoglin / CD105 / ENG 人細(xì)胞裂解液 SH-SY5Y(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) BRL 3A, 大鼠肝正常細(xì)胞
產(chǎn)品型號(hào)：
更新日期：2024-12-11
訪問(wèn)次數(shù)：524
人表皮角化細(xì)胞的詳細(xì)資料：
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人表皮角化分離自皮膚組織；表皮位于動(dòng)物皮膚的外層，由胚胎時(shí)期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角化細(xì)胞（KC）是構(gòu)成表皮的主要細(xì)胞成分，在體內(nèi)處于不斷增殖過(guò)程中，分裂的角化細(xì)胞主要位于其基底層，少數(shù)位于棘細(xì)胞層。隨著向表層的推移，細(xì)胞的分化程度逐漸增加，并喪失分裂活性。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人表皮角化細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 皮膚組織 |
英文名稱(chēng) | Human Epidermal Keratinized Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人表皮角化先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人表皮角化經(jīng)PCNA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶(hù)自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 試劑盒
People of cyclooxygenase 2 (COX-2) ELISA Kit 人環(huán)加氧酶2(COX-2)檢測(cè)試劑盒
Rabbiturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkit 兔型纖溶酶原激活物(uPA)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAP13(Humanapelin13)ELISAKit人apelin13
血清樣品樹(shù)脂法去內(nèi)毒素試劑盒20次
PorcineIerleukin18,IL-18ELISAKit豬白介素18(IL-18)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
CD3D重組小鼠 CD3d / CD3 delta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
多功能肽酶2(LMP2)重組蛋白 Recombinant Large Multifunctional Peptidase 2 (LMP2)
MZB1重組人 MZB1 / PERP1 蛋白 Protein
CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白
TGFBR2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TGFBR2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
多功能肽酶2(LMP2)重組蛋白 Recombinant Large Multifunctional Peptidase 2 (LMP2)
CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白
CD3D重組小鼠 CD3d / CD3 delta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
TGFBR2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TGFBR2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
MZB1重組人 MZB1 / PERP1 蛋白 Protein
小鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human phospho protein kinase C (P-PKC) ELISA Kit 人0酸化蛋白激酶C(P-PKC)檢測(cè)試劑盒
HumanLipoxinA4,LXA4ELISAKit 人脂氧素A4(LXA4)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenInsulin-likegrowthfactors1,IGF-1檢測(cè)試劑盒雞胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞DAPKINASE蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次
MousegranzymesA,Gzms-AELISAKit小鼠顆粒酶A(Gzms-A)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
人表皮角化細(xì)胞小鼠心素(mouse ANP) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠凋亡誘導(dǎo)因子(mouse AIF) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠抗利尿激素/血管加壓素(mouse AVP/ADH) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠固(mouse ALD) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
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