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產品名稱:人顱蓋造骨細胞

產品特點:人顱蓋造骨細胞公司正在出售的產品KM3, 人多發性骨髓瘤細胞 木瓜蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL 大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r5 CNE-1細胞,高分化鼻咽癌細胞 人卵巢癌細胞,8910PM細胞 人前脂肪細胞-內臟裂解物HPA-v L ENPEP Others

產品型號:

更新日期:2024-12-12

訪問次數:389

人顱蓋造骨細胞的詳細資料:

人顱蓋造骨細胞

實驗報告:

人顱蓋造骨細胞
一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細胞簡介:

人顱蓋造骨細胞

人顱蓋造骨分離自顱骨組織;造骨細胞(osteoblast)亦稱成骨細胞。是參與骨組織形成的細胞。顱骨位于脊柱上方,由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規則骨組成。除下頜骨及舌骨外,其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結,起著保護和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部,內有顱腔,容納腦,共8塊。面顱為顱的前下部分,包含眶、鼻腔、口腔等結構,構成面部的支架,共15塊。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞,負責骨基質的合成、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建,骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區域,分泌酸性物質溶解礦物質,分泌蛋白酶消化骨基質,形成骨吸收陷窩;其后,成骨細胞移行至被吸收部位,分泌骨基質,骨基質礦化而形成新骨;破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關鍵。成骨細胞培養不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統疾病的分子和細胞學基礎,也是藥物篩選、生物材料開發和生物工程研究的重要手段。

產品名稱

人顱蓋造骨細胞

組織來源

顱骨組織

英文名稱

Human Calvarial   Osteoblast Cells

產品規格

5×105cells/T25細胞培養瓶

 

方法簡介:

人顱蓋造骨細胞

公司實驗室分離的人顱蓋造骨采用膠原酶消化法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的人顱蓋造骨經ALP染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息:

人顱蓋造骨細胞

培養基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相:空氣,95%CO25%

人顱蓋造骨細胞

注意事項:

人顱蓋造骨細胞
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現象。觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養基重懸細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產品:
人顱蓋造骨細胞

大鼠鈣調素(CAM)檢測試劑盒 ,英文名: CAM ELISA Kit

Lester pig mononucleosis septozotocin (listeriolysin) ELISA Kit 豬單核細胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)檢測試劑盒

轉基因植物NPTⅡ基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMCP-2/CCL8(Humanmonocytechemotacticprotein2)ELISAkit人單核細胞趨化蛋白2

體液腺苷酸環化酶(AdenylateCyclase)活性熒光定量檢測試劑盒20

ELISAKitIFN-α貓α干擾素

IGFBP3重組人 IGFBP3 / IBP3 蛋白 Protein

結合蛋白4(RBP4)重組蛋白 Recombinant Retinol Binding Protein 4, Plasma (RBP4)

CD48重組人 CD48 / SLAMF2 / BCM1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IL17RA Protein Human 重組人 IL17RA / CD217 蛋白

HA Protein H12N5 重組甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

結合蛋白4(RBP4)重組蛋白 Recombinant Retinol Binding Protein 4, Plasma (RBP4)

IL17RA Protein Human 重組人 IL17RA / CD217 蛋白

IGFBP3重組人 IGFBP3 / IBP3 蛋白 Protein

HA Protein H12N5 重組甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

CD48重組人 CD48 / SLAMF2 / BCM1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

豚鼠免疫球蛋白G2(IgG2)檢測試劑盒 ,英文名: IgG2 ELISA Kit

Human granulysin (histatin 5) ELISA Kit 人富組蛋白(histatin 5)檢測試劑盒

rabbitImmunoglobulinG,IgGELISAKit 兔子免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBAFF-R(HumanBcellactivationfactorrfromthetumornecrosisfactorfamilyreceptor)ELISAKitB細胞活化因子受體

線蟲補骨脂素(4-imethylpsoralen)誘導突變試劑盒10

Rabbitcatecholamine,CAELISAKit兔兒茶酚胺(CA)檢測試劑盒規格:96T/48T

人顱蓋造骨細胞含量測試盒   可見分光光度法   50/48

脫氫酶測試盒   紫外分光光度法   50/48

還原糖含量測試盒   可見分光光度法   50/24

纖維素酶(CL)測試盒   可見分光光度法   50/24


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