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細胞簡介：

兔腹膜間皮分離自腹膜組織；腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜，主要由間皮細胞構成，藉由結締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內的器官，能分泌黏液潤濕臟器的表面，減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和神經組織經由腹膜與外界相連；腹膜也具有吸收撞擊保護內臟的效果。腹膜（peritoneum）為全身面積大、配布復雜的漿膜，由皮及少量結締組織構成，薄而光滑，呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內表面的腹膜稱為壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄層；覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù)、移行，共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙，稱為腹膜腔（peritoneal-cavity）。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內有少量漿液，在臟器活動時可減少摩擦。腹膜間皮細胞屬于上皮組織中的單層扁平上皮，是覆蓋于腹膜表面的一層細胞。間皮細胞是構成間皮的細胞，正常大小約為15-25微米，細胞常呈圓形或者卵圓形。其功用是提供潤滑，使器官與器官、器官與胸膜與腹膜間都能得到良好的保護，不會互相磨損受傷。而間皮所生產的潤滑和保護作用就是靠間皮細胞所分泌的物質來達成，分泌物多半為細胞外基質、玻尿酸類物質。

方法簡介：

實驗室分離的兔腹膜間皮采用混合膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的兔腹膜間皮經PCK、Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔腹膜間皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產品：

大鼠轉化生長因子β1(TGFβ1)檢測試劑盒 ，英文名： TGFβ1 ELISA Kit

Mouse ai cardiolipin aibody IgM (ACA-IgM) ELISA Kit 小鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)檢測試劑盒

MouseActivinAELISAKit 小鼠活化素A(Activin-A)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumankeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit人角化細胞內分泌因子

微粒體S轉移酶(GSHST)活性酶動力比色法定量檢測試劑盒20次

大鼠抗IgE受體抗體ELISAKit大鼠抗IgE受體抗體ELISAKit，大鼠抗IgE受體抗體ELISAKit，

LGALS1重組大鼠 Galectin-1 / LGALS1 蛋白 Protein

FGFR2(Fibroblast Growth Factor Receptor 2 0.5mgFGFR2(Fibroblast Growth Factor Receptor 2) 成纖維細胞生長因子受體2抗原

CSTA重組人 Cystatin A / CSTA 蛋白 Protein

HFE2 Protein Human 重組人 Hemojuvelin / HFE2 蛋白

LXN Protein Mouse 重組小鼠 LXN / Latexin 蛋白

FGFR2(Fibroblast Growth Factor Receptor 2 0.5mgFGFR2(Fibroblast Growth Factor Receptor 2) 成纖維細胞生長因子受體2抗原

HFE2 Protein Human 重組人 Hemojuvelin / HFE2 蛋白

LGALS1重組大鼠 Galectin-1 / LGALS1 蛋白 Protein

LXN Protein Mouse 重組小鼠 LXN / Latexin 蛋白

CSTA重組人 Cystatin A / CSTA 蛋白 Protein

小鼠P物質(SP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat glucocoicoid receptor (GR) ELISA Kit 大鼠糖皮質類固醇受體(GR)檢測試劑盒

Human17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISAKit 人17羥孕酮(17-OHP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumancoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-Ag檢測試劑盒人Ⅷ相關抗原(Ⅷ-Ag)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

組蛋白脫乙?；?span>8(HDAC8)活性比色法定量檢測試劑盒20次

humaESTcorepressor3,RCOR3ELISAKit人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔腹膜間皮細胞兔熱休克蛋白40(HSP-40)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔熱休克蛋白20(HSP-20)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔固（ALD）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔去甲上腺素(NA)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。